多重抗藥性結核分枝桿菌中Pyrazinamide抗性及pncA基因型變異的探討   陳玟仲1、吳崑銘1,2、陳昭賢1 中國醫藥大學醫學檢驗生物技術學系所1、芮弗士醫事檢驗所2，台灣   Pyrazinamide resistance and pncA genotypic diversity of multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis   Chen, Wein-Chung1, Wu, Kun-Ming1,2 , Chen, Chao-Hsien1 Department of Medical Laboratory Science and Biotechnology, China Medical University1, Taiwan Rui-Fu-Shi Medical Laboratory2, Taiwan   對結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis，TB)的治療及防制而言，抗藥性的問題是一大隱憂，在結核病的治療藥物中，以rifampin (RMP)及isoniazide (INH)的抗藥性最令人困擾，結核分枝桿菌中，若對RMP及INH具有抗藥性則稱之為多重抗藥性(MDR)菌株，MDR-TB往往導致結核病發病率及死亡率的增加，所以藥物的改善及複雜性治療也成為目前最重要的課題，在RMP及INH的合併藥物中，pyrazinamide (PZA)是一種常被使用的一線有效藥物。在先前的研究中，已針對台灣西部近五年結核分枝桿菌抗藥性做分析，篩選出許多具有多重抗藥性菌株，本研究從中挑出56株MDR菌株，進一步分析PZA的多重抗藥性，以MGIT method來進行藥物感受性實驗，使用PZA的標準濃度為25-50μg/mL，結果發現在這些MDR-TB中有66.1 % (37/56)是對PZA有抗藥性。由一些文獻資料中得知，PZA的代謝與pncA基因所表現的蛋白有關，PncA酵素蛋白會將PZA會轉變成為 pyrazinoic acid，進而抑制結核菌中fatty acid 的合成，臨床上部份會耐PZA的結核分枝菌，是由於其pncA基因突變所致。本研究又從對PZA有抗藥性的MDR-TB中，取13株與標準菌株H37RV 做序列比對，發現其突變率為69.2 % (9/13)，其突變點也不盡相同，且發現有些菌株不只一處突變點，分別有8-Cyt→Ade、19-Gua→Thy、24-Cyt→Ade、 80Thy→Cyt、102-Cyt→Gua、169-Cyt→Gua、214-Thy→Cyt、226-Ade→Cyt、247-Cyt→Thy、 329-Gua→Ade、442-Cyt→Thy、464-Thy→Gua499-Ade→Gua、及525 Guanine deletion等。我們將再進一步的討論突變與基因的關係，進而了解PncA蛋白中耐PZA的功能性位置，可藉由分子生物技術方法全盤了解PZA的抗藥性。此結果的呈現可做為結核病臨床檢驗的依據，也希望未來能做為為分子檢驗的參考指標。